| |
| |||||||
| التسجيل | التعليمـــات | قائمة الأعضاء | التقويم | البحث | مشاركات اليوم | اجعل كافة المشاركات مقروءة |
| مخبر التحاليل الطبية عالم آخر ، هنا في المخبر ، المخبر الذي يعطينا التقييم للكثير من الأمور التي تساعدنا في الانطلاق نحو الحل |
 |
| | LinkBack | أدوات الموضوع | طرق مشاهدة الموضوع |
11-Oct-2008, 11:40 PM
| ||||
| ||||
 صبغة جرام ( Gram stain ) صبغة جرام ( Gram stain ) تعتبر صبغة جرام ( Gram stain ) من أهم أنواع الصبغات المستخدمة في المستشفيات للتعرف على البكتيريا . و يعود الفضل في اكتشافها إلى الطبيب ذو الأصل الدانماركي هانس كريستيان غرام (Hans Christian Gram) الذي كان يعمل في مختبر التشريح التابع لمستشفى Berlin في العام 1880 للميلاد. حيث قام بتطوير هذه الطريقة لتساعده على تفرقة أنواع البكتيريا المسببة لذات الرئة او التهاب الرئوي الحاد (Pneumonia)، حيث كانت أحد أنواع البكتيريا تصبغ بلون أحمر و أطلق عليها (بكتيريا سالبة جرام) و الأخرى باللون الأزرق او البنفسجي (بكتيريا موجية جرام). و يعتمد لون البكتيريا في صبغة جرام على التركيب الكيميائي لجدار الخلية. البكتيريات المختلفة تتفاعل بشكل متفاوت مع طريقة التلوين. لذلك تنقسم البكتيريات إلى: • غرام- موجبة : وتتلوّن إجمالاً باللون الأزرق الغامق ( البنفسجي ) • غرام- سالبة : تبقى عبر غرام دون تلوين - وإنّما تلوّن باللون الأحمر عبر safranin ينتج عن ذلك تشخيص مختلف حسب سماكة الجدار الخلويّ للبكتيربا المعيّنة وبالتالي أدوية مختلفة للعلاج. البكتيريات السالبة والموجبة تتجاوب بشكل مختلف مع المضادّات الحيويّة. بهذه الطريقة التي تستغرق القليل من الوقت (تقريبًا خمس دقائق) يستطيع المرء أن يحدّد التصرّف البكتيريّ حسب غرام وبالتالي أن يحدّد طريقة البدء مباشرة بعلاج غالبًا ما يكون منقذًا لحياة المريض حتّى قبل التحديد النهائيّ لنوع البكتيريا والذي يستغرق العديد من الأيّام. صباغة البكتيريا ب Gram stain 1- تحضير المواد اللازمة للصباغة / distilled-water / لهب بنزن / حوض للصباغة / Iodine / crystal violet / alcohol aceton solution / Safranin / normal saline / wire loop /slid /) 2- عمل مسحة بكتيرية باتباع ما يلي : • تحضير slide نظبف ويكتب عليه اسم المريض على طرفه ، وفي منتصف slide نضع قطرة من Normal-saline • حرق wire loop (تعقيمة) وذلك بابقائة على اللهب حتى يحمر • بجانب لهب بنزن نفتح طبق بتري المحتوي على البكتيريا المطلوب صباغتها ونغرس wire loop في ال Agar بمنطقة لاتحتوي على نمو بكتيري ثم نرفعه • نأخذ 2-3 bacteria colony ونضعهم على قطرة Normal-saline ونمزجهم جيدا mix ستلاحظ تعكر Normal-saline • نحرق wire loop مرة اخرى ونعيده لمكانه ونترك المسحة لتجف في الهواء • تحذير لا يجوز استخدام الحرارة لتجفيف المسحة لان ذلك يشوة الخلايا المتواجدة • إجراء عملية التثبيت Fixation للبكتيريا بواسطة لهب بنزن (الحرارة ) وذلك بتمرير slide المحتوي على المسحة فوق اللهب من4 الى 5 مرات . إن هذه العملية تساعد على تغيير طبيعة الإنزيمات المحللة وذلك بمنع التحلل الذاتي للبكتيريا وكذلك الحرارة تعمل على زيادة الالتصاق الخلايا بالشريحة وعدم إجراء هذه الخطوة يعني خسارة البكتيريا المتواجدة على slide مع اول غسلة لها (وطبعا تكون المسحة البكتيرية من الاعلى وليست من جهة اللهب) 3- عملية الصباغة : الطريقة تتألّف من ثلاث خطوات هي: • التلوين- إزالة التلوين- ثمّ التلوين المعاكس • ضع slide المحتوي على المسحة البكتيرية المطلوب صباغتة على حوض الصباغة (وطبعا الجهة المحتوية على المسحة تكون للاعلى ) • اولاً : تغمر الشريحة بCreystal violet ذو اللون البنفسجي وتترك لمدة دقيقة واحدة ثم تشطف الشريحة slide بالماء المقطر distilled water وذلك للتخلص من الصبغة الزائدة • ثانياً: تغمر الشرحة ب iodine ذو اللون الأصفر وتترك لمدة دقيقة ثم تشطف بالماء • ثالثا: تغمر الشريحة ب alcohol acetone solution المحضر بنسبة 1:1 ذو اللون الشفاف المستخدم لاستخلاص الصبغة decolorizer وتترك لمدة 30 ثانية ثم تشطف بالماء المقطر • تحذير: إذا زادة المدة عن 30 ثانية سوف يؤدي ذلك لظهور نتائج متغايرة وتحديدا سؤدي ذلك لتحول g+ve إلى g-ve • رابعاً: تغمر الشريحة ب safranin ذو اللون الاحمر الغامق التي تستخدم كصبغة بديلة counter stain وتترك لمدة دقيقة ثم تشطف بالماء المقطر • تجفف الشريحة المصبوغة باستخدام ال filter paper • تفحص الشريحة على العدسة الزيتية قوة تكبير 100 النتائج تصبغ باللون الأزرق ( البنفسجي ) gram + تصبغ باللون الاحمر gram - لمشاهدة الفيديو انقر الرابط أدناه http://video.google.com/googleplayer...42274630&hl=en  
__________________  التعديل الأخير تم بواسطة : نسمة أمل بتاريخ 11-Oct-2008 الساعة 11:45 PM.  |
|
22-Dec-2008, 12:24 PM
| ||||
| ||||
| رد: صبغة جرام ( Gram stain ) شكراً لك أخي على المرور الكريم اتمنى للجميع الفائدة من هذه المعلومات
__________________ |
|
30-Jun-2009, 09:51 PM
| |||
| |||
| رد: صبغة جرام ( Gram stain ) هل تسمى الصفرانين بالصبغة الناقصة |
|
21-Sep-2009, 10:55 PM
| |||
| |||
| رد: صبغة جرام ( Gram stain ) يعطيج العافية مشرفتنا الموضوع والفيديو وايد رووووعة لا حرمنااااا |
|
| الذين يشاهدون محتوى الموضوع الآن : 1 ( الأعضاء 0 والزوار 1) | |
| أدوات الموضوع | |
| طرق مشاهدة الموضوع | |
| |
العرض العادي
